梯度液相色谱仪梯度洗脱时为何产生“鬼峰”

　　梯度洗脱带来的“鬼峰”来源很多，其中主要来源于流动相和管路，几乎都有一个共同的机制：

　　当流动相具有较高的洗脱强度时，流动相中有紫外吸收的有机杂质在柱上聚焦成组分带，并随后在梯度中洗脱。这些流动相杂质的潜在“来源”是广泛的(如有机相中污染物，水相中污染物，缓冲盐类，流动相瓶和混合过程产生等)。其他原因包括流动相输送的物理或机械方面、样品引入和固定相效应。各种来源的鬼峰，让鬼峰处理变得非常困难。

　　在色谱分离中，纵向扩散会增加分离组分带宽。等度液相色谱中，尽量在纵向扩散超出接受范围之前洗脱。在梯度洗脱色谱，因为流动相配比的变化导致动态压缩组分带的主动聚焦机制(带/峰压缩)。梯度色谱运行，是峰宽扩散和聚焦同步过程的产物。

　　聚焦机制可想象一个组分带广泛扩散在高效液相色谱柱的顶部。当施加溶剂梯度时，带后部的有机溶剂浓度总是高于带前部。带前的组分分子比带后的组分分子更强地被固定相保留，带后的成分分子更快移动，导致落后的组分分子会被更强的洗脱液聚集，并更快地向前移动以赶上其余的。

　　带聚焦机制可聚焦流动相中存在的有机杂质。在低洗脱剂浓度下有一定保留的杂质可能会随着梯度逐渐聚集成峰。在充分聚焦后，流动相鬼峰与分析物峰形接近或相同，聚焦不*时，它们会变得更宽或变成其他形状。理想梯度的液相色谱流动相到达梯度最大，该处应仅包含预期的溶剂和试剂，不包含其他物质。梯度高效液相色谱分析的不只是样品，也分析流动相的杂质和仪器路径的溶剂。为了区分真实的分析物峰和这些鬼峰，必须进行空白进样的检查（溶剂空白）。